細(xì)胞因子是由免疫細(xì)胞（如單核、巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞等）和某些非免疫細(xì)胞（內(nèi)皮細(xì)胞、表皮細(xì)胞、纖維母細(xì)胞等）經(jīng)刺激而合成、分泌的一類具有廣泛生物學(xué)活性的小分子蛋白質(zhì)。具有調(diào)節(jié)固有免疫和適應(yīng)性免疫、血細(xì)胞生成、細(xì)胞生長、APSC多能細(xì)胞以及損傷組織修復(fù)等多種功能。細(xì)胞因子可被分為白細(xì)胞介素、干擾素、腫瘤壞死因子超家族、集落刺激因子、趨化因子、生長因子

細(xì)胞因子在體內(nèi)具有重要的病理指示作用，在感染、炎癥、自身免疫病、免疫缺陷疾病等狀態(tài)下，很多細(xì)胞因子的表達(dá)水平會(huì)發(fā)生顯著變化。通過對體液中細(xì)胞因子濃度的檢測可以對疾病診斷和治療做出相應(yīng)評(píng)價(jià),具有重要的研究及臨床應(yīng)用價(jià)值。由于血清、細(xì)胞培養(yǎng)上清、積液中的細(xì)胞因子含量低，不容易檢測，加上樣本數(shù)量少，傳統(tǒng)的方法無法滿足多細(xì)胞因子檢測。如傳統(tǒng)ELISA方法，一次只能檢測一種細(xì)胞因子，如果需要檢測10種細(xì)胞因子，需要的樣本量ⅹ10，且需要進(jìn)行多次重復(fù)操作，耗費(fèi)了大量的樣本量和人力成本。

流式編碼微球芯片技術(shù)（Cytometric Bead Array， CBA），是用流式細(xì)胞儀對多重蛋白進(jìn)行定量檢測的方法，能夠同時(shí)對樣本中的多個(gè)指標(biāo)進(jìn)行定性、定量檢測，可應(yīng)用于細(xì)胞因子檢測。目前CBA 檢測系統(tǒng)采用聚苯熒光編碼微球（有磁性/非磁性）連結(jié)特定的捕獲抗體，捕捉待測物，同時(shí)再加入待測物的熒光抗體，三者形成夾心復(fù)合物，通過流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測。流式細(xì)胞術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是同時(shí)可以進(jìn)行多參數(shù)檢測，快速并且信息量大，其優(yōu)勢體現(xiàn)在：

（1）能夠同時(shí)對單個(gè)樣本進(jìn)行多種檢測

血清Th1／Th2／Th17 相關(guān)細(xì)胞因子是實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常會(huì)用到的檢測指標(biāo)，然而實(shí)驗(yàn)室常用的模式動(dòng)物小鼠的血清量少，很難運(yùn)用傳統(tǒng)的方法如ELISA法進(jìn)行多因子檢測，而CBA 法正好能解決這一問題。碧芯生物的Beadstar-mPlexTM系列的多細(xì)胞因子檢測試劑盒是基于CBA技術(shù)的細(xì)胞因子檢測試劑盒，只需要一份樣品，就能同時(shí)定量檢測小鼠血清中的10種細(xì)胞因子（IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、MCP-1、IFN-γ、TNF-α、IL-12p70、IL-1β），可滿足大多數(shù)研究的需求。

（2）所需樣本量少、靈敏度高等

傳統(tǒng)ELISA方法每項(xiàng)實(shí)驗(yàn)樣本用量50-200 μl，基于CBA檢測方法的碧芯生物的Beadstar-mPlexTM多細(xì)胞因子檢測試劑盒樣本用量僅需要20 μl，大部分指標(biāo)的線性范圍在3-2500 pg/mL。對于稀有樣本，即使?jié)舛容^低，Beadstar-mPlexTM多細(xì)胞因子檢測試劑也可定量同時(shí)檢測到多個(gè)細(xì)胞因子的表達(dá)水平。

（3）穩(wěn)定性好

流式細(xì)胞術(shù)檢測用于細(xì)胞因子檢測是一種高通量、快速、重復(fù)性好并能準(zhǔn)確定量的方法。能避免酶聯(lián)免疫放大技術(shù)使信號(hào)失真導(dǎo)致的假陽性

（4）檢測流程短，操作簡單。

相比較于ELISA試劑盒的繁瑣操作，CBA操作更為簡單迅速。Beadstar-mPlex^TM系列的產(chǎn)品采用的是磁性熒光編碼微球。通過磁分選作用，將未反應(yīng)物去除，可省去大量重復(fù)離心清洗步驟。

（5）檢測率高（碧芯生物的Beadstar-mPlex^TM多細(xì)胞因子*優(yōu)勢）：由于正常人的血清中細(xì)胞因子濃度較低，在實(shí)際檢測中，目前大部分基于CBA試劑盒對正常人血清中各細(xì)胞因子的檢出率不高，一些血清樣本的熒光值甚至低于對照品濃度為0時(shí)的熒光值。結(jié)果的準(zhǔn)確性不高，究其原因主要是熒光編碼微球?qū)晒鈾z測抗體的非特異吸附較強(qiáng)，導(dǎo)致噪音較高（噪音為對照品為0時(shí)的檢測熒光值-微球本底檢測熒光值）。當(dāng)檢測低值血清樣本中，血清中存在復(fù)雜的蛋白質(zhì)體系，不可避免這些蛋白質(zhì)同樣會(huì)與微球產(chǎn)生非特異性吸附，從而與熒光檢測抗體競爭非特異性吸附位點(diǎn)，使最終的熒光檢測值下降。因此減少熒光編碼微球?qū)晒鈾z測抗體的非特異性吸附可顯著提升低值血清樣本檢測的準(zhǔn)確性。碧芯生物科技（海南省）有限公司通過不斷摸索和優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，通過合成一種特殊的三種粒徑不同的微球，再用Avidin修飾微球表面，最終構(gòu)建了約60種低吸附的熒光編碼微球。與普通的熒光編碼微球相比，這些被特殊的的微球具有對蛋白質(zhì)低非特異性吸附的特點(diǎn)。因此，用這種包裹好的熒光編碼微球構(gòu)建的抗原檢測試劑的噪音值明顯降低，可顯著提升靈敏度及低值血清樣本的檢出率